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바실러스속 생균제인 Saltose의 가금 병원균에 대한 항균 효과

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학위구분 석사
일반장르 E-학위논문
서명사항
     서명 바실러스속 생균제인 Saltose의 가금 병원균에 대한 항균 효과
저자사항(개인명)
     저자명 김재환
     저자명 Kim,Jae-Hwan
     학과/전공 생명환경과학대학원 식품과학과 식품가공학전공
발행사항
     발행기관 고려대학교
     발행년 2008
     졸업년월 200802
     본문언어 kor
주제사항
     일반주제어 Saltose 생균제 살모넬라 가금티푸스 파라티푸스 Saltose Probiotics Salmonella fowl typhoid paratyphoid fever
소장정보
     소장위치 고려대학교 과학도서관
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목차/초록

본 연구는 Bacillus licheniformis와 Bacillus subtilis로 구성된 혼합 생균제를 이용하여 닭의 세균성 질병의 원인균에 대한 항균 효과를 규명하고자 실시 하였다. 즉, 사료의 가공 공정시의 열처리 및 사료 섭취 시의 안정성을 평가하기 위하여, 초기의 균 수와 내열성, 내산성 및 내답즙성을 유산균을 대조군으로 하여 측정하고 그 결과를 비교하였다. 또한, 양계 산업에 치명적인 손실을 유발하는 세균성 전염 질병의 원인균인 Escherichia coli 및 Salmonella속에 대한 항균성 실험을 실시하였으며, 장내 유익균인 유산균에 대한 영향을 연구하였다.
혼합 생균제의 생균수는 1.28×109 CFU/g으로 측정되었으며, 내열성 실험에서는 유산균들이 65℃ 및 85℃에서 10분 경과 시부터 급속히 사멸하는 것과 달리, 초기 균수를 약 107 CFU/ml로 조정하여 1시간 경과 후 65℃와 85℃에서 모두 균 수에 큰 변화가 없이 안정한 것으로 나타났다. 또한, pH 2, 3, 4, 6, 7로 조정된 인공위액에서의 내산성 실험에서는 pH 2에서는 2시간 경과 후까지 다소 감소하는 경향이 있었으나, 이 후 환경에 적응하면서 초기 균 수 이상으로 증식하였고, pH 3에서 pH7의 범위에서는 대부분 1시간 경과 시까지 균 수가 다소 감소하였으나, 이 후 초기 균 수와 비슷한 생존율을 유지하거나, pH 환경에 적응하여 점차 증식하는 경향을 관찰할 수 있었다. 하지만, 대조군으로 사용된 Lactobacillus acidophilus 또한 pH2에서 시간의 경과와 관계없이 균 수의 변화가 없이 뛰어난 내산성을 나타냈다. 0.3%와 0.5% 농도의 인공 담즙산(artificial bile acid)에서의 내담즙성 실험에서는 유산균은 0.3%의 인공 담즙산에서 균 수가 감소하는 경향을 보인 반면, 혼합 생균제는 인공 담즙산의 농도에 관계없이 사멸하지 않고 시간이 경과함에 따라 증식하는 것을 관찰할 수 있었다. 이상의 결과로부터, 바실러스속으로 구성되어 있는 혼합 생균제는 내열성, 내산성, 내담즙성이 매우 뛰어나, 사료의 가공공정과 닭의 섭취 시에 사멸하지 않고 장에 도달하여 그 활성을 유지할 수 있을 것으로 생각된다.
또한, 닭에 있어 세균성 전염병을 유발하는 원인균들에 대한 항균 활성을 조사한 결과 S. gallinarum과 S. enteritidis에 대하여 농도 의존적으로 항균 활성을 가진다는 것은 확인하였으나, 그 외 Salmonella pullorum, Salmonella typhimurium과 E. coli에 대한 항균 활성은 확인할 수 없었다. 이상의 결과로부터 본 실험에 사용된 바실러스속 혼합 생균제는 닭의 세균성 전염병 중에서 S. gallinarum에 의한 가금티푸스와 S. enteritidis에 의해 유발되는 파라티푸스에 대한 예방 및 치료에 도움이 될 것으로 사료된다.
장내 유익균에 대한 영향도 측정하였으나, 혼합 생균제는 실험에 사용된 어떠한 유산균에도 영향을 미치지 않았다.

이상의 결과로부터, 바실러스속으로 이루어진 혼합 살균제는 사료의 가공 공정에 안정하며, 섭취 후에도 위액이나 담즙 등에 의해 사멸되지 않고 장까지 도달할 수 있는 안정한 생균제이며, 장내 유익균은 억제하지 않으나, 닭의 전염성 질병 중 가금티푸스나 파라티푸스와 같은 S. gallinarum과 S. enteritidis를 원인균으로 하는 질병의 예방 및 치료에 도움이 될 가능성이 있는 것으로 보인다.
This experiment was conducted to investigate the antibacterial effects against chicken pathogens such as Escherichia spp., Salmonella spp., by multiple probiotics (Saltose made by PIC-Bio Inc. in Japan) which consist of Bacillus licheniformis and Bacillus subtilis.
 In order to study stabilities such as heat-resistance, acid-tolerance and bile-resistance, 6 kinds of Lactic acid bacteria were used including Lactobacillus plantarum (Mamis 13, Mamis 29, Yejin 0802-10), Lactobacillus brevis (Yejin 0802-1) and Lactobacillus acidophilus (4356, 30SC) as controls. Although almost Lactic acid bacteria were dead 10 minutes after heat-treatment at both 65℃ and 85℃, multiple probiotics showed the same levels of viabilities one hour after heat-treatment at both 65℃ and 85℃. In the tests of acid-tolerance, despite Lactobacillus acidophilus (30SC) were very stable even in pH 2, multiple probiotics were slightly decreased one hour after acid-treatment from pH 2 – 7 but were recovered to the initial level three hours after the treatment. Meantime, multiple probiotics were not decreased but propagated in both 0.3% and 0.5% artificial bile acid for 24 hours at 37℃ despite Lactic acid bacteria were decreased even in 0.3% artificial bile acid on the same condition. In this respect, multiple probiotics were considered to reach to the large intestine without death after chicken’s intake.
The antibacterial activity of multiple probiotics were determined using pour-plate method against pathogens of chicken diseases such as Escherichia coli O1:K1:H7 (KCCM 40405), Escherichia coli O78:K80:H12 (KCCM 12451), Salmonella typhimurium (KCCM 11806), Salmonella gallinarum (KCTC 2931), Salmonella pullorum (KCTC 2932), Salmonella enteritidis.  As results, multiple probiotics showed concentration-dependent antibacterial activity against S. enteritidis and S. gallinarum but did not have antibacterial activity against other bacteria. From these results, multiple probiotics may be effective in prevention or remedy of chicken diseases such as fowl typhoid and paratyphoid fever caused by S. gallinarum and S. enteritidis.
However, multiple probiotics did not have antibacterial activity against various Lactic acid bacteria including Lactobacillus plantarum (Mamis 13, Mamis 29, Yejin 0802-10), Lactobacillus brevis (Yejin 0802-1), Lactobacillus acidophilus (4356, 30SC).

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